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“這里是實驗室，你跟著我們的工作人員一步一步來做，或許你就會明白DNA鑒定是怎么回事。”上海親子鑒定中心法醫(yī)物證司法鑒定所助理研究員張宇跟記者說了多遍操作流程，記者還是無法理解。隨后，他讓記者跟隨劉軍、楊麗兩位實驗人員進入實驗室，一步步見證DNA鑒定結(jié)果是如何出爐的。 第一步：待檢準備 唾液飛沫絕不能混入 走入該鑒定所實驗室的大門前，記者被要求套了鞋套并換上消毒干凈的服裝。實驗人員則全副武裝：一次性的帽子、口罩、手套，一樣都不能少。 進入實驗區(qū)域后，記者發(fā)現(xiàn)了一個有趣的現(xiàn)象：實驗室的走廊外，畫著一個個醒目的前行箭頭。據(jù)介紹，進入實驗室的人，必須要嚴格按照這地上的箭頭行進；而且，每進一個房間，就要換不同的衣服，誰也不可走“回頭路”。“這主要是為了預防實驗室細菌的交叉?zhèn)魅荆_保DNA準確率。”楊麗說。 “帽子要戴到頭發(fā)不外露的程度，口罩就不用說了，手套也要包住袖口。”劉軍說，這些都是為了讓檢材不受到任何影響。為了說明這個問題，他舉了個例子：在很多年以前，有個同事做DNA鑒定，由于沒戴口罩，同事的唾液飛沫掉進了裝DNA樣本的小試管里。最后檢出的結(jié)果里邊，居然有這個同事的DNA信息。換句話說，這次實驗失敗了。 第二步：DNA提取 100℃下孵育10分鐘逼出DNA 目前，最為常見的是通過血液進行DNA鑒定，也就是說，要采集血樣做鑒定。 “試管內(nèi)我們已經(jīng)提前放入了DNA提取液。”楊麗說，血液標本內(nèi)有紅細胞、白細胞及雜質(zhì)等諸多東西，提取液的作用是將DNA提取出來，并去除其他的物質(zhì)。 提取完成后，要把小試管放入干式恒溫器。“這一步的作用是孵育DNA，孵育環(huán)境是100℃的溫度，時長是10分鐘。”劉軍說，通過孵育，NDA將充分暴露，更方便提取。
第三步： 冰箱冷藏 試劑和DNA樣本充分混合 取樣完成后，要將DNA 的提取物放到冰箱冷藏備用。等提取物冷卻后，再拿出一個更小的試管，這個新試管當中有從試劑盒中調(diào)配的試劑。 這是最為費錢的一步，因為試劑盒是進口的，每次加入的試劑費用就要數(shù)百元 。在進入加樣區(qū)之前，實驗人員先是打開了紫外線消毒燈。“現(xiàn)在要對整個房間進行消毒，確保加樣房間沒有任何的病菌及粉塵等，實驗者也盡量不要說話。” 實驗人員提醒道。 試劑里邊包括酶、引物等試劑，每個試管要加入0.2微升。加入試劑后，要將小試管放入小的混合器，讓試劑和DNA樣本充分混合。 第四步：擴增 DNA提取物不斷繁殖分裂 為了能達到檢測需求的量，要把小試管放入一個叫做擴增儀的儀器。把試管放入擴增儀后，里邊的DNA提取物將不斷繁殖、分裂。 在一般情況下，經(jīng)過2-3個小時的擴增，DNA提取物的量就能達到檢測量。也就是說，要真正進行DNA 檢測、比對了。 第五步：檢測 提取16個位點數(shù)據(jù)進行比對 檢測是在一個叫做310熒光自動測序儀當中進行的，這種設(shè)備非常先進，把擴增完的小試管放入儀器后，設(shè)備會自動從試管中提取DNA提取物，然后自動選擇DNA位點，分析染色體。在一般情況下，設(shè)備會自動提取16個位點，然后，系統(tǒng)自動將需要做親子鑒定的兩個樣本進行自動比對。 根據(jù)遺傳學原理，如果所有的位點遺傳信息都能匹配成功，我們也就能大概說，這對父子或者母子是親子關(guān)系。即便有一兩個位點不能成功匹配，在一般情況下，也能作出否定的結(jié)論。“每個人都會有兩條染色體，一條是父親給予的，另一條是母親給予的。在同一個點位上也會出現(xiàn)兩條相同的數(shù)值，一個數(shù)值來自母親，另一個數(shù)值來自父親。如果孩子有的數(shù)值父親和母親的都沒有，那么他們就很有可能不是親子關(guān)系。”當然，這是最簡單、最直觀的看法，要判斷孩子是否是親生，還要經(jīng)過更加嚴謹?shù)挠嬎恪！ ∮嬎銜r，有個親權(quán)指數(shù) (PI) 計算，因為在該公式類似于（p除以p+1）的模式，這個模式?jīng)Q定其結(jié)果不可能是整數(shù)。而且，因為世上沒有絕對相同的DNA，因此大概只能算出約99.9%的準確率。
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